食品级 西安达尔闻 着色剂 红曲黄 CAS50980-32-0

分离纯化

1、黄色素粗提液的制备

收集摇瓶发酵液菌体，烘干后研磨成粉末。采用70%乙醇溶剂超声提取红曲色素，提取液于旋转蒸发器中50℃、100 MPa条件下真空浓缩去除乙醇溶剂，旋蒸后的浓缩液进行预冻处理，最后置于冷冻干燥机中冷冻干燥成粉末。称取2 g红曲色素粉末溶于10 mL正己烷溶剂，于超声中50℃提取1 h，过滤除去粉末残余杂质得黄色素混合粗提液。

2、柱层析的预处理

硅胶的预处理：称取14 g硅胶于110℃活化1 h后放入干燥的烧杯中冷却，加适量的溶剂溶解并浸泡30 min（浸泡硅胶的溶剂与洗脱黄色组分的溶剂相同）。

硅胶装柱：清洗干净玻璃层析柱，干燥后，湿法装柱，本实验层析柱规格（ψ20 mm×200 mm）。将层析柱垂直固定在铁架台上，将浸泡好的硅胶连同溶剂均匀倒入层析柱内。待柱子上端的悬浮液慢慢下降到需要的高度，铺一层海砂防止加样与洗脱时扰动柱表面，最后用洗脱剂平衡2个柱体积。

上样：平衡柱子后，待平衡液的弯月面正好与硅胶床面持平时，将用洗脱溶剂提取后的红曲黄色素粗提液加到柱表面，操作时要小心谨慎以免扰动柱表面。

样品的洗脱：洗脱红曲黄色素选用正己烷、石油醚、乙酸乙酯三种常用低极性溶剂，按一定体积配比混合后作为洗脱剂，收集黄色组分，经一系列操作后浓缩干燥得红曲黄色素。